کمپانی « برادران وارنرز » سازنده فيلم ۳۰۰ در واکنش به اعتراض شماری از ايرانی ها، در بيانيه ای گفته است اين کمپانی قصد توهين به هيچ فرهنگ، مليت و يا نژادی را نداشته و هدف از ساختن اين فيلم بيان واقعيت و سند تاريخی نيست، بلکه اين فيلم تخيلی و صرفاً برای سرگرمی ساخته شده است.
به دنبال اعتراض برخی از ايرانيان خارج از کشور به اين فيلم، نمايندگی جمهوری اسلامی در سازمان يونسکو در پاريس هم طی نامه ای به مديرکل اين سازمان، فيلم مذکور را توهين آميز خوانده وخواهان محکوميت شرکت فيلم سازی وارنرز شده است.
داستان فيلم سيصد به لشگرکشی خشايارشاه هخامنشی به يونان مربوط است که نزديک به ۲۵ قرن پيش آتن را فتح کرد.